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南方医科大学学报 2006
构建egfp-pdx-1融合表达载体电穿孔转染大鼠胎肝干细胞的研究, PP. 750-753 Keywords: 肝干细胞,绿色荧光蛋白,载体构建,胰十二指肠同源盒基因-1,电穿孔 Abstract: 目的构建pdx-1绿色荧光蛋白融合表达载体,电穿孔转染入大鼠胎肝干细胞以得到稳定表达。方法从sk900/blscript质粒中扩增pdx-1,将其插入pegfp-c1的多克隆位点中,构建重组质粒pegfp-c1-pdx-1;分离培养大鼠胎肝干细胞,经鉴定后用电穿孔法转染;分析转染前后细胞生长曲线,荧光显微镜下观察、rt-pcr鉴定转染结果。结果重组质粒经酶切鉴定正确无误,经电穿孔转染后gfp和pdx-1基因均能在胎肝干细胞中保持较长时间稳定表达,并对胎肝干细胞的生长增殖影响较小。结论成功构建了pdx-1绿色荧光蛋白融合表达载体,能在胎肝干细胞中较稳定表达,为研究pdx-1在干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞中的调控作用提供了物质基础。?
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