铁皮石斛野生居群研究(ⅳ):rapd反应体系的构建与优化

为获得铁皮石斛rapd的最佳反应体系,本文对影响rapd反应的模板含量、mg2+浓度、dntp浓度、taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛rapd反应最适扩增体系是:25μlpcr反应体积,10×buffer2.5μl,2.5mmol/lmgcl2,dntp2.5μl(各2.5mmol/l),模板dna为30ng,taq聚合酶1.5u,随机引物12pmol,ddh2o14.2μl.最佳扩增程序:94℃预变性3min,94℃变性