中华补血草issr-pcr体系的构建与正交优化
, PP. 93-97
Keywords: 中华补血草,issr,反应体系,正交优化
Abstract:
为获得中华补血草issr的最佳反应体系,采用正交试验设计,对影响issr反应的模板含量、mg2+浓度、dntp浓度、taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行优化筛选.通过各因子的组合研究,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立了可用于中华补血issr-pcr分析的稳定可靠的反应体系:25μlpcr反应体积,10×buffer2.5μl,2mmol/lmgcl2,dntp100μmol/l,模板dna为20ng,taq聚合酶1.5u,随机引物0.4μmol/l,退火温度52℃～58。所建立的中华补血草issr反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点，可以较好地应用于中华补血草的遗传多样性及物种保护的研究．
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