一种dna侧翼序列分离技术――tail-pcr

<正>在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知dna序列邻近的未知序列,热不对称交错pcr(简称tailpcr)反应技术能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的pcr循环,利用不同的退火温度选择性地扩增目标片段,所获得的片段可以直接用做探针标记和测序模板。tailpcr技术简单易行,反应高效灵敏,产物的特异性高,重复性好,能够在较短的时间内获得目标片段,已经成为分子生物学研究中的一种实用技术。笔者综述了tailpcr反应的原理、引物设计、反应条件设置及产物分析。