美洲黑杨i-69树皮中多酚氧化酶同工酶的提纯和特性

<正>美洲黑杨ⅰ-69树皮内有两个多酚氧化酶同工酶(ppoa和b)。ppoa和b经硫酸铵沉淀,sephadexg-100和deae-纤维素柱层析分别提纯6.7和5.9倍,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一的带。ppoa和b的分子量为38900和33000。ppoa含赖氨酸残基最多(86个),含精氨酸残基最少(3个),不含酪氨酸和脯氨酸残基;ppob含丝氨酸残基最多(37个),含精氨酸残基最少,不含酪氨酸和色氨酸残基。ppoa和b的最适ph为6.4和7.0,最适温度为50℃和45℃。ppoa比b具有较好的热稳定性。在测定的酚类化合物中,ppoa和b对邻苯二酚的亲和性最大,k_m值最小,分别为0.39mm和0.34mm,均属邻苯二酚酶。ppoa和b的活力受1mm的l-半胱氨酸、硫代硫酸钠、硫脲、二乙基二硫代氨基甲酸钠、氯化钠和蔗糖抑制及被0.1mm的氯化钠和蔗糖促进。