山羊δfosb基因重组腺病毒载体的构建

【目的】利用腺病毒padeasy-1表达系统构建含山羊δfosb基因的重组腺病毒，为在原代细胞中研究该基因的功能奠定基础。【方法】扩增山羊的δfosb基因，与padtrack连接构建padtrack-ha-δfosb。用padtrack-ha-δfosb转化含有padeasy-1的bj5183细胞，同源重组后获得重组腺病毒质粒pad-ha-δfosb，用其转染hek293细胞，包装得到重组腺病毒。对重组腺病毒进行pcr和westernblot鉴定。【结果】酶切鉴定、绿色荧光蛋白观察及pcr均证明，重组腺病毒质粒构建正确；westernblot检测到了δfosb蛋白的表达。【结论】成功构建获得了可表达δfosb蛋白的重组腺病毒rad-ha-δfosb。