山羊腺垂体细胞的分离培养与鉴定

【目的】探讨山羊腺垂体细胞的分离和培养方法，为其体外分泌特性研究奠定基础。【方法】采集山羊腺垂体，分别用胰蛋白酶、胶原酶、胰蛋白酶和胶原酶混合、胰蛋白酶和透明质酸酶混合对其进行消化，所获细胞培养后采用免疫细胞化学法进行鉴定，评价细胞消化结果和腺垂体细胞的生长特性。【结果】山羊腺垂体组织在37℃条件下，以1g/lⅳ型胶原酶和1g/l透明质酸酶混合消化2.5~3h，消化效果较好；所得细胞在培养24h开始贴壁，72h后细胞主要呈多角形或梭形，连接成片，培养6d左右细胞即可铺满培养器皿的细胞生长面。免疫细胞化学鉴定结果显示，fsh阳性细胞胞质呈蓝色，prl阳性细胞胞质呈蓝褐色；放射免疫分析法测定表明，分离、培养的腺垂体细胞具有激素分泌活性。【结论】采用筛选的消化和分离方法可获得山羊腺垂体细胞，所获腺垂体细胞体外培养体系,可用于体外研究腺垂体细胞的功能和内分泌调控作用。