利用反相高效液相色谱法测定发酵液中的生物素含量

为了利用反相高效液相色谱法(rp-hplc)更准确地测定发酵液中的生物素含量,以安捷伦zor-baxsb-c18(4.6cm×250cm,5μm)为色谱柱,对液相色谱紫外线检测波长和流动相的溶液配比、k2hpo4离子浓度和ph值进行筛选。结果表明,以体积分数91.5%k2hpo4(0.04mmol/l)与体积分数8.5%ch3cn混合液为流动相,在ph值为2.5和紫外检测波长为215nm的条件下,获得的生物素吸收峰面积与质量浓度的线性相关系数达0.9999,生物素加标回收率达99.07%～101.26%,相对标准偏差为0.48%～0.82%。由此可见,在上述条件下高效液相色谱法不仅可用于发酵液中生物素含量的测定,而且操作简便,测定结果可靠。