杠柳新苷t人工抗原合成及多克隆抗体制备

【目的】合成并鉴定杠柳新苷t人工抗原，制备多克隆抗体，为进一步开展杠柳新苷类化合物作用机理的研究奠定基础。【方法】以杠柳新苷t为起始反应物，与丁二酸酐反应生成杠柳新苷t的衍生物(半抗原)，采用hplc-elsd、ms和nmr对衍生物的结构进行鉴定；将半抗原与载体蛋白（bsa和ova）进行偶联，采用紫外图谱对人工抗原进行鉴定，并采用2,4,6-三硝基苯磺酸(tnbs)法测定结合比；以乳化的人工抗原免疫8周龄雌性balb/c小鼠获得杠柳新苷t的多克隆抗体，并测定其效价。【结果】成功合成杠柳新苷t的半抗原和人工抗原，半抗原和载体蛋白（bsa和ova）的结合比分别为5∶1和7∶1。免疫小鼠后产生针对杠柳新苷t的特异性抗体，其效价为1∶1600，对杠柳新苷t的半数抑制浓度（ic50）为12.4294μg/ml。【结论】制备了杠柳新苷t的多克隆抗体，可以用于杠柳新苷t作用靶标的定位研究。