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西北农林科技大学学报(自然科学版) 2004
基于smad7基因为靶序列的rna干涉作用研究, PP. 13-17 Keywords: 小干涉rna,smad,7基因,体外转录,瞬时转染,靶序列 Abstract: 为了探讨小干涉rna(sirna)对靶基因smad7mrna表达的阻断作用,采用体外转录方法制备smad7基因的小干涉rnas(sirnas),用脂质体介导瞬时转染berp35t-2肺癌细胞系,并采用northernblot杂交检测靶基因mrna的表达丰度.结果表明,根据smad7编码区序列在体外成功地制备了针对2个不同靶序列的sirnas;northernblot杂交显示,在转染sirna的berp35t-2细胞中,不管是内源性的还是外源性的,smad7mrna的表达丰度均明显下降.说明smad7基因编码区中542～563bp及701～722bp2个区域均是sirna作用的有效靶序列,本研究设计并制备的sirnas能有效抑制smad7基因的表达.
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