根癌农杆菌感受态细胞的制备以及质粒prokⅱ对其转化的研究

研究了根癌农杆菌lba4404和c58c1生长的培养基类型、菌株生长状态、转化溶液、质粒与感受态细胞共放置时间、质粒加入量、液氮速冻时间及热激条件对质粒prokⅱ转化的影响。结果表明,以70mmol/lcacl2作为转化溶液,yeb培养基制备的、od600为0.5的lba4404感受态细胞与10ng质粒dna,于0℃共放置30min,液氮速冻5min,37℃热激5min时转化率最高,达1.40×105μg-1;以70mmol/lcacl2作为转化溶液,yeb培养基制备的、od600为0.5～0.6的c58c1感受态细胞与20ng质粒dna,于0℃共放置10min,液氮速冻1min,37℃热激1min时转化率最高,达1.33×105μg-1。