烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

根据烟草蚀纹病毒（tev）cp序列设计合成上下游引物，利用rt-pcr方法获得了tevcp基因，大小为789bp。将tevcp基因克隆到pmd18-tsimplevector，经ecorⅰ/sacⅰ双酶切得到目的片段，并将其定向插入到pet30a载体中构建了原核表达载体pet30-tevcp，重组质粒经ecorⅰ和sacⅰ双酶切鉴定及基因测序验证正确后，转化大肠杆菌bl21，用iptg进行诱导表达。结果表明，tevcp基因在大肠杆菌中获得了高效表达，分子量约为37ku。以表达产物为抗原免疫家免，制备了特异性抗血清，其效价为1/1204。westernblot检测结果表明．制备的抗血清可用于检测田间的发病植株。