人类原始生殖细胞的体外培养

为了探讨人原始生殖细胞（primordialgermcells．pgcs）的体外分离培养条件及相关影响因素，以小鼠胚胎成纤维细胞（mouseembryonicfibroblasts，mef）作为饲养层，室温下用1.25g/l胰蛋白酶＋0.2g/ledta消化人胚胎组织5～9min，或用1g/l胶原酶（ⅳ型）消化20～40min，分离得到pgcs，然后用不同培养液培养，从培养液角度较为系统的研究原代培养人原始生殖细胞的条件。结果表明。在ksr培养液（体积分数15％knockoutserumreplacement＋高糖dmem＋10ng/ml。人重组白血病抑制网子（lif）＋4ng/ml人重组碱性成纤维细胞生长因子＋10ng/mlforskolin）和sto（建系的小鼠胚胎成纤维细胞）条件培养液中培养的原代人原始生殖细胞，有较高的克隆形成率；培养液中添加不同质量浓度的lif对克隆形成率影响差异不大。