牛疱疹病毒i型gb基因原核表达载体的构建和高效表达

用pcr法扩增了牛疱疹病毒ⅰ型barthanu/67株gb基因，将其插入原核表达载体pbad/topo中构建重组质粒pbad-gb。将pbad-gb质粒转化大肠杆菌top10后进行了诱导表达，对表达产物进行了纯化和抗原性检测，并通过改变诱导剂l-arabinose的浓度和诱导时间对诱导表达条件进行了优化。结果表明，重组质粒pbad-gb构建成功，gb蛋白获得了高效表达，并以包涵体形式存在，纯化后gb蛋白的纯度达90%以上，gb蛋白抗原性良好，最佳诱导表达条件:l-arabinose终浓度为0.2g/l，诱导时间为5h。