昆虫病原线虫共生细菌的分子鉴定及其培养特性的初步研究

【目的】确定昆虫病原线虫共生细菌yl001和yl002菌株的分类及其系统进化地位,并为该类生物资源的后续研究及开发应用奠定基础。【方法】对yl001和yl002菌株进行分子鉴定,pcr扩增并克隆其16srrna全序列,对其全序列进行了序列测定及系统进化分析,并采用参数测定法对其培养特性进行了初步研究。【结果】yl001和yl002菌株与嗜线虫致病杆菌(xenorhabdusnematophila)种内菌株形成一个类群,序列同源性大于99%,与发光杆菌(photorhabdus)属内菌株的序列同源性大于94%。2菌株的延缓期、对数生长期、稳定期和衰亡期分别为0～6,6～18,18～66和66h;培养12h后,yl001和yl002菌株发酵液的ph值分别降低至5.70和5.56,此后逐渐上升,至发酵结束时其ph值分别为7.74和8.07;培养0～18h时2菌株发酵液中还原糖含量迅速降低,此后保持稳定;12h时氨基氮含量达到最低,此后开始缓慢上升;yl001菌株培养54h后及yl002菌株培养42和66h后,其对番茄灰霉病菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用最强。【结论】yl001和yl002菌株属于嗜线虫致病杆菌种内的菌株;yl001和yl002菌株的培养特性符合细菌生长和代谢的一般规律,其适宜的发酵周期分别为54和66h。