基于永生化猪小肠上皮细胞zym-siec02对猪源益生性乳酸菌的筛选

【目的】从健康仔猪的粪便及各肠段内容物和黏液中分离乳酸菌，并以永生化猪小肠上皮细胞zym-siec02为体外细胞模型对猪源益生性乳酸菌进行筛选。【方法】采用分离培养和常规生化试验对乳酸菌进行分离与鉴定。用永生化猪小肠上皮细胞zym-siec02作为体外模型，通过黏附性试验、耐酸耐胆盐试验和对致病菌的黏附抑制试验对菌株进行筛选。【结果】分离筛选出了12株乳酸菌，其黏附能力存在差异。y091231、y091221、y224031、x302032、y223052和y223072等6株菌的黏附性较好，黏附指数依次为：2903.25±83.33，2320.37±81.02，1965.43±37.72，1416.12±62.74，1100.00±68.10，988.73±17.06。对其进行耐酸耐胆盐试验和抑菌试验，结果表明，菌株y091231、y091221和y224031对致病菌均具有较强的黏附抑制能力，且对高胆盐、低ph具有较强的耐受性。其中y091231对大肠杆菌c83921的黏附抑制率可达(99.40±3.17)%，y091221对致病性沙门氏菌的黏附抑制率为(97.10±2.04)%，y091231对金黄色葡萄球菌cvcc2258的黏附抑制率为(98.00±2.31)%。y091231、y091221和y2240313株菌分别被鉴定为发酵乳杆菌、乳酸乳杆菌和嗜酸乳杆菌。【结论】筛选得到的3株益生性乳酸菌，不仅具有耐酸耐胆盐能力，而且对小肠黏膜上皮细胞具有强黏附性，对大肠杆菌c83921、致病性沙门氏菌和金黄色葡萄球菌cvcc2258具有较强的黏附抑制能力，可作为肠道微生态制剂的候选菌株。