斑蝥素人工抗原的制备与初步鉴定

【目的】合成并鉴定斑蝥素人工抗原，为建立斑蝥素的酶联免疫分析方法提供依据。【方法】对斑蝥素进行化学修饰，引入羟基合成n羟乙基斑蝥酰亚胺（by），并经ms、nmr、ir法对其结构进行鉴定。进一步经琥珀酸酐法合成琥珀酸酯（bys）并纯化，在此基础上，分别采用混合酸酐法和碳二亚胺法将半抗原与载体蛋白偶联，合成斑蝥素的人工抗原（bys-hs-bsa、bys-ty-bsa、bys-hs-ova、bys-ty-ova），并经ms、ir法对人工抗原进行定性鉴定。免疫原免疫兔子获得抗斑蝥素多克隆抗体并测定其效价。【结果】成功合成了一种斑蝥素半抗原，与载体蛋白bsa、ova偶联后得到免疫原（bys-hs-bsa、bys-ty-bsa）和包被原（bys-hs-ova、bys-ty-ova），免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体，效价分别为8000和16000。【结论】初步合成并鉴定了斑蝥素人工抗原，在设计合成斑蝥素的半抗原时不能破坏其关键的环结构。