抗苦马豆素抗体elisa检测方法的建立

[目的]建立一种敏感性高、特异性强的抗苦马豆素(swainsonine,sw)抗体的elisa检测方法.[方法]用sw人工抗原(sw-bsa)免疫小鼠,制备抗sw血清,通过elisa法进行血清抗sw抗体效价检测,比较以sw-ova或sw为包被抗原的检测结果,分析包被抗原浓度、封闭剂等对测定结果的影响,以确定测定的最佳条件.[结果]以sw-ova为包被抗原的检测结果明显优于以sw为包被抗原;抗苦马豆素抗体的最佳测定条件为:以1.0μg/mlsw-ova作为包被抗原,于4℃包被过夜或37℃包被2h,选用15g/l的明胶作为封闭剂,酶标抗体的工作浓度为1∶1500.[结论]建立的抗苦马豆素抗体elisa检测方法,特异性强、稳定性高,为进一步研究苦马豆素人工抗原的免疫原性等奠定了基础.