hcvp7下调基因p7tp2启动子序列的克隆及转录活性检测

[目的]克隆p7tp2基因的启动子区域,并检测hcvp7tp2启动子的转录活性.[方法]通过分析确定p7tp2基因翻译起始密码子atg上游1203bp至下游147bp的基因组dna序列作为启动子,克隆启动子片段并构建载体pcat3-p7tp2-p和pglb-p7tp2-p,转染hepg2细胞,应用cat表达系统和双荧光素酶系统检测启动子活性.[结果]克隆了预测具有启动子活性的片段,成功构建了pcat3-p7tp2-p和pglb-p7tp2-p载体,转染pcat3-p7tp2-p的hepg2细胞,cat表达活性是转染pcat3-basic细胞的5.98倍；转染pglb-p7tp2-p的hepg2细胞,双荧光素酶表达活性是转染pglb细胞的9.67倍.[结论]克隆的p7tp2启动子序列与预测的序列一致,并且具有启动子转录活性.