草莓镶脉病毒（svbv）启动子的克隆及序列分析

【目的】对草莓镶脉病毒（svbv）启动子进行序列测定和分析，为进一步研究该启动子稳定表达活性、表达类型及驱动外源基因稳定表达提供理论依据。【方法】用ctab法从感染svbv的草莓叶片中提取总dna，设计特异性引物扩增svbv启动子，克隆并测序。将svbv启动子与花椰菜花叶病毒属其他成员的启动子核苷酸序列进行比较，并构建其系统关系树，再用plantcare软件分析svbv启动子序列中的各个作用元件。【结果】获得全长为1017bp的svbv启动子。序列比列表明，本研究构建的中国svbv启动子与美国svbv启动子序列相似性最高，达77.29%。从构建的系统关系树可以看出，中国svbv启动子与美国svbv启动子单独聚成一个亚分支，说明来源于草莓的2个svbv启动子亲缘关系最近。另外，svbv启动子和花椰菜花叶病毒（camv）启动子亲缘关系虽然相对较近，但二者序列相似性较低，说明svbv启动子与camv35s启动子的结构差异较大。进一步分析表明，svbv启动子除了具有一般植物启动子的典型作用元件tata-box和caat-box外，还具有一些与组织特异性表达或诱导表达相关的调节因子。【结论】svbv启动子具有多种转录顺式作用元件，可能是一个在双子叶植物中具有较强驱动活性的组成型启动子。