抗鸭副粘病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定

【目的】制备抗鸭副粘病毒(dpmv)的单克隆抗体，为鸭副粘病毒病免疫学诊断方法的建立奠定基础。【方法】采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心法提纯dpmv，免疫balb/c小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞株sp2/0融合，采用间接elisa、间接免疫荧光试验（ifa）和血凝抑制（hi）试验等方法筛选阳性杂交瘤细胞株，并测定其生物学特性。【结果】筛选到7株能稳定分泌抗dpmv单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为j28、f4、b3、e39、e41、a12和a30。这7株单克隆抗体都具有elisa和1fa特性，其中j28和f4还具有hi和中和特性。免疫球蛋白亚类测定结果显示，j28和f4均为igg1，其他5株均为igm。相加elisa试验结果显示，单抗b3，j28与f4，a30与e39/e41/a12分别识别3个不同的抗原位点。特异性测定结果显示，7株单克隆抗体与雏番鸭细小病毒(mpv)、鹅细小病毒(gpv)、鸭肝炎病毒(dhv)、番鸭呼肠孤病毒(mdrv)及正常细胞均无交叉反应。【结论】筛选出了7株具有elisa、1fa等特性且分泌抗dpmv单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并明确了各株单克隆抗体的特性，为鸭副粘病毒病的免疫治疗和临床诊断奠定了基础。