添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响

研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明，在24h内使小鼠胚胎贴壁率达86％以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离和克隆；在es细胞培养液中，犊牛血清体积分数以15％～20％为宜，在dmem（l）培养液中添加0.1μmol/lna2seo30.1mmol/lβ-巯基乙醇＋10ng/mligf100ng/mllif，能显著提高牛es细胞分离与克隆效率；低糖dmem比tcm199和高糖dmem更适宜于牛es细胞的分离。优秀胚胎形成的团状icm更适宜于分离与克隆es细胞，在37℃用低体积分数消化液处理icm或es细胞集落，再以机械将其离散为细胞小块，es细胞克隆效率最高。