山羊乳腺上皮细胞培养体系的建立

为研究乳腺上皮细胞增殖和分化特性及其基因表达的分子机制，建立了山羊乳腺上皮细胞培养体系。用无菌手术法从健康第二胎泌乳期山羊乳腺取得组织块，在体外条件下用组织块法进行原代培养。基础培养液用rpmil640，含胎牛血清150ml/l，添加egf(10μg/l)、胰岛素(0.1mg/l)、e2(1μg/l)、氢化可的松(0.1mg/1)、孕酮(1mg/l)、青霉素(0.1g/l)及链霉素(0.05g/l)，在铺有胶原的塑料培养板上培养。从细胞接种存活率、细胞群体倍增时间、细胞生长曲线和细胞分裂指数4个方面考察了乳腺上皮细胞的生物学性状。结果表明，在此培养体系中，山羊乳腺上皮细胞生长良好，增殖旺盛。细胞产物电泳及蛋白印迹分析结果表明，培养的细胞为山羊乳腺上皮细胞，并具有表达山羊酪蛋白的功能。