丙型肝炎病毒囊膜蛋白基因疫苗的构建及其诱导小鼠体液免疫应答

将丙型肝炎病毒（hcv）h77株全长囊膜蛋白基因克隆到真核表达载体pcdna4.0的cmv启动子下游，采用磷酸钙转染法将重组质粒转入293t细胞，用流式细胞仪检测细胞瞬时表达的目的蛋白。将构建的重组质粒肌注balb/c小鼠，用表达hcv囊膜蛋白的sp2/0细胞作为抗原，用流式细胞仪检测小鼠血清hcv囊膜蛋白抗体。再用原核系统表达的e2蛋白作为抗原,westernblot检测免疫小鼠血清抗体。试验结果显示,囊膜蛋白e1e2在293t细胞膜上进行了瞬时表达，基因疫苗免疫小鼠后产生了抗hcv囊膜蛋白的抗体，该抗体能与表达hcv囊膜蛋白的sp2/0细胞特异性结合，westernblot表明该抗体也能与原核系统表达的e2蛋白结合。