农杆菌介导的菜心遗传转化体系的建立

以建立的菜心高频再生体系为基础，利用gus染色组织分析法研究了根癌农杆菌菌株、乙酰丁香酮（as）、预培养时间、浸染时间和共培养时间等因素对菜心（brassicacampestrisl．var，parachinesis）子叶遗传转化的影响，探讨了适宜菜心转化的卡那霉素与抑菌抗生素使用浓度。结果表明，农杆菌菌株agl0对菜心的浸染能力最强，添加100μmol/l的乙酰丁香酮有利于菜心转化；子叶外植体预培养2d后浸染（菌液浓度od600值为0.8）15min，共培养2d，然后转移到含15mg/l卡那霉素和100mg/lticarcillin的筛选培养基上，进行转化植株的再生，植株再生率及外植体gus阳性率均较高，是较优的转化条件；本试验共获得8株转化植株，转化率达2.44％，经pcr分析和southern杂交检测表明，gus基因已整合进入菜心基因组。