pegfp-htert载体的构建及其在牛a型精原细胞中的表达

为了构建端粒酶逆转录酶表达载体，用带有绿色荧光蛋白报告基因的载体pegfp-c1和带有htertcdna的载体pcl-neo-htert，通过基因重组构建新的载体pegfp-htert，转化后筛选阳性克隆进行酶切鉴定；pegfp-htert载体通过脂质体介导法转染纯化后的牛a型精原细胞，观察绿色荧光表达，g418筛选阳性克隆。结果表明，pegfp-htert载体与预设计的一致；pegfp-htert载体转染牛a型精原细胞后，经筛选获得了1个表达绿色荧光蛋白的阳性细胞克隆。由此可见，htert表达载体得到了成功构建，并在牛a型精原细胞中实现了表达。