谷胱甘肽硫转移酶与hegf在大肠杆菌中的融合表达及活性研究

为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子（hegf）,将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pgex-4t-1（＋）-hegf转化入bl21-codonplustm-rp表达宿主菌进行大量表达,sds-page分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在。收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过glutathionesepharosetm4b纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白。以兔抗人egf单克隆抗体为一抗,进行westernblotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hegf。最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hegf生物学活性。