大豆种子特异性启动子的克隆及功能分析

【目的】从大豆中克隆得到β伴球蛋白α亚基基因的启动子序列7αp，并对其进行功能分析。【方法】利用pcr技术从大豆基因组dna中分离β伴球蛋白α亚基基因启动子序列7αp，将其与gus基因融合，构建种子特异性表达载体p7αpgus，通过根癌农杆菌介导法转化烟草(nicotianatabacum)nc89，对再生植株进行pcr、southernblot检测和gus组织化学分析。【结果】序列分析表明，7αp长度为1382bp，其中含有多种种子特异性启动子的序列元件，如ry重复序列元件、e-box、sef1-motif、sef4motif、（ca）n、dc3启动子结合因子和acgt序列元件及一些诱导物应答元件。转基因植株的pcr和southernblot结果显示，成功地获得了转基因阳性植株；gus活性检测表明，仅能在种子中检测到gus活性，而在根、茎和叶等其他组织中均未检测到gus活性。【结论】大豆β伴球蛋白α亚基基因上游1382bp片段具有种子特异性启动子功能，7αp为种子特异性启动子。