猪瘟病毒囊膜蛋白在杆状病毒表面的展示及展示蛋白的免疫原性试验

【目的】研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪瘟基因工程亚单位疫苗。【方法】利用杆状病毒表面展示（baculovirusdisplay）技术，构建展示猪瘟病毒（csfv）囊膜蛋白的重组杆状病毒bacsc-e0e1e2，该重组杆状病毒带有his6标签，且胞质区域（ctd）和跨膜区域（tm）均来源于杆状病毒囊膜蛋白gp64的ctd和tm。对重组杆状病毒进行westernblot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验、血清中和试验。【结果】westernblot分析结果表明，重组杆状病毒中表达了重组e0e1e2蛋白；激光共聚焦显微镜检测结果表明，重组杆状病毒感染昆虫细胞sf9后在昆虫细胞膜上表达了重组e0e1e2蛋白；免疫金电子显微镜观察表明，重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上；动物免疫试验表明，重组杆状病毒免疫小鼠血清od450值达到1.82；血清中和试验表明，免疫小鼠的血清50%中和效价（pd50）达到512。【结论】成功构建了表面展示猪瘟囊膜蛋白的重组杆状病毒。