基因枪法介导的转kn2基因小麦的获得及鉴定

【目的】获得转kn2基因的小麦植株，为研究kn2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用，以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料，通过基因枪法，用含有kn2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织，经过除草剂（phosphinothricin，草丁膦）筛选和愈伤组织分化获得再生植株，并对得到的再生小麦植株进行pcr检测。【结果】采用基因枪法共轰击小偃22的幼胚愈伤组织1680个，共获得再生植株17株，移栽到花盆中成活15株；根据目标基因序列设计特异引物，对成活的小麦植株进行pcr检测，结果表明获得含有bar基因和kn2基因的转基因阳性植株分别为6株和4株，转化率分别为0.36%和0.24%，bar和kn2的共转化率为0.24%。【结论】kn2基因成功地转入到小麦品种小偃22中。