西农萨能奶山羊insig-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达

【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(insig1)编码区，并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总rna，反转录cdna后进行pcr反应，对克隆得到的insig-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量pcr(rt-qpcr)检测insig-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊insig-1基因1014bp序列(genbank登录号jq665439)，其中编码区序列长度为831bp，编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊insig-1编码区与牛(genbank登录号nm_001077909)的亲缘关系最近，相似性达97%，编码氨基酸序列的相似性达90%，而与小鼠(genbank登录号nm_025836)的亲缘关系较远。预测insig-1蛋白质分子量为29.70ku，理论等电点为8.99；insig-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构，且有较强的疏水性，不含信号肽。rt-qpcr检测结果表明，在西农萨能奶山羊10个组织中insig-1均有表达，其中在肝脏中的相对表达量最高，皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之，在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的insig-1基因，并探明了其组织表达规律。