植物鞘氨醇-1-磷酸对暗诱导蚕豆气孔关闭及保卫细胞胞质ph和no的影响

【目的】了解植物鞘氨醇-1-磷酸（phyto-s1p）在暗诱导蚕豆气孔关闭中的作用及信号转导过程，为进一步阐明暗调控植物气孔运动的信号转导机制提供依据。【方法】以蚕豆（viciafaba）为材料，借助药理学试验，基于一氧化氮（no）特异荧光探针（daf-2da）和ph特异荧光探针（bcecf-am）的激光共聚焦显微技术，通过测定气孔开度和保卫细胞no和ph水平的变化，确定phyto-s1p在暗诱导蚕豆气孔关闭中的作用机制。【结果】暗处理能显著诱导蚕豆气孔关闭且可引起no水平升高，这种效应可被长链碱基激酶抑制剂dl-threo-二氢鞘氨醇（dl-threo-dhs）和-n，n-二甲基鞘氨醇（dms）显著抑制；外源phyto-s1p可明显诱导蚕豆气孔关闭，且可以提高no水平，但no特异清除剂cptio和nos抑制剂l-name可明显抑制phyto-s1p的这些效应，表明phyto-s1p通过诱导no的产生介导暗诱导气孔关闭。此外，暗诱导胞质ph升高和气孔关闭可被dl-threo-dhs和dms显著抑制，外源phyto-s1p可以明显诱导胞质ph升高和气孔关闭，且phyto-s1p的这种效应可被丁酸显著抑制，该结果提示phyto-s1p通过诱导胞质碱化参与暗诱导气孔关闭。外源phyto-s1p处理引起的保卫细胞胞质ph升高较no水平升高滞后期短，达到峰值更早，且phyto-s1p引起的no水平升高可被丁酸显著抑制，这进一步证实phyto-s1p诱导保卫细胞胞质碱化是no产生的先决条件。【结论】phyto-s1p通过诱导保卫细胞胞质碱化和no产生介导暗诱导蚕豆气孔关闭，胞质碱化是no产生的诱导因素。