淡色库蚊xnd-p450基因cdna全长克隆及表达

【目的】克隆淡色库蚊氯菊酯抗性相关xnd-p450基因，并对其进行生物信息学分析，研究其在敏感品系和抗性品系淡色库蚊中表达量的差异，为阐明xnd-p450的功能和抗性机制奠定基础。【方法】依据淡色库蚊抗性品系与敏感品系差异表达的est片段设计pcr引物，采用race技术克隆淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因xnd-p450全长cdna序列，并对其进行生物信息学分析；采用半定量pcr技术，对xnd-p450基因在敏感品系和抗性品系淡色库蚊中的表达量差异进行检测。【结果】经过克隆获得长度为1679bp的淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因xnd-p450全长cdna，编码523个氨基酸。生物信息学分析表明，该基因与致倦库蚊、埃及伊蚊xnd-p450基因的同源性在70%以上，其编码蛋白相对分子质量为33244.9u，理论等电点为8.10，属于不稳定的亲水蛋白，氨基酸序列与致倦库蚊及冈比亚按蚊cyp450蛋白的同源性在40%以上。半定量pcr电泳分析显示，抗性品系淡色库蚊中的xnd-p450基因表达量较敏感品系高。【结论】克隆了淡色库蚊氯菊酯抗性相关xnd-p450基因，该基因在抗性品系淡色库蚊中的表达量高于敏感品系，推测其与氯菊酯抗性相关。