sirna-cycline对家蚕细胞增殖的影响

【目的】研究小干扰rna（smallinterferingrna，sirna）对家蚕卵巢细胞系（bmn）细胞cycline基因表达及细胞周期的影响。【方法】合成针对cycline基因1252和568位点的sirna片段，并利用脂质体法转染家蚕bmn细胞，于共聚焦荧光显微镜下观察转染情况；应用实时荧光定量pcr法检测cyclinemrna的表达情况，流式细胞仪检测细胞周期。【结果】sirna对家蚕bmn细胞的转染效率达80%左右。转染1252-sirna-cycline和568-sirna-cycline48h后，分别使家蚕bmn细胞cyclinemrna表达量降低了68%和90%；流式细胞仪检测结果显示，2个转染组g0/g1期细胞比例显著增大，s期和g2/m期细胞比例显著减小。【结论】在家蚕bmn细胞中导入针对cycline的sirna，可有效抑制cycline基因的表达，使细胞周期阻滞于g1期，进而抑制细胞增殖。