碘乙酰胺和紫外线对烟草原生质体的钝化作用

【目的】探索烟草原生质体钝化的临界处理剂量,为不对称体细胞杂交技术改良和创新烟草种质奠定基础。【方法】以不同碘乙酰胺（ioa）浓度（0.1,0.25,0.5,0.75,1.0mmol/l)和3种处理方法（不静置直接700r/min离心5min，静置5min后700r/min离心5min，静置3min后700r/min离心2min）,以及紫外线（uv）照射（2根15w紫外灯,距灯管25cm处照射0.5,1,4,5,7,10，15min）处理烟草原生质体，并进行融合培养，研究烟草原生质体钝化的临界处理条件。【结果】烟草原生质体对ioa十分敏感，以0.1mmol/lioa静置3min后700r/min离心2min可使烟草原生质体钝化停止分裂，临界状态原生质体比例最高为92.9%；uv连续照射15min的烟草叶肉原生质体失活，但大多数原生质体处于临界状态，比例为91.4%；2种临界处理后的原生质体融合后形成杂种细胞，能进行正常的细胞分裂。【结论】0.1mmol/lioa静置3min后700r/min离心2min或2根15w紫外灯连续照射25cm处的烟草原生质体15min，是烟草原生质体钝化的临界处理，2种临界处理后的原生质体融合体由于生理代谢上得到互补形成杂种细胞，恢复了分裂能力。