吉林地区高致病性prrsvjl-04/12株的分离鉴定与全基因组测序

【目的】确定吉林省某疑似高致病性prrs猪场的病原，研究其基因特性。【方法】采集疑似感染高致病性prrsv病猪的脏器组织,处理后接种marc-145细胞，观察细胞病变，分离prrsv；应用rt-pcr方法检测和确定分离毒株的基因型，采用间接免疫荧光、电镜观察和全基因组测序检测分离的病毒。【结果】分离毒株为北美洲型prrsv，命名为jl-04/12，其基因组全长为15320bp（不包括polya），可使marc-145细胞产生典型的细胞病变。序列比对结果表明：jl-04/12株与经典毒株vr-2332和ch-1a的核苷酸同源性分别为89.5%和94.9%；与高致病性毒株jxa1、hun4的核苷酸同源性为99.1%。分离毒株jl-04/12编码的2个非结构蛋白和gp2～gp4的氨基酸序列与hun4株同源性较高，在97.2%～99.3%，而jl-04/12编码的gp5的氨基酸序列与jxa1株同源性较高，为98.5%；jl-4/12编码的gp6和n蛋白的氨基酸序列与高致病性prrsv毒株jxa1和hun4的同源性均为100%。prrsvjl-04/12株的nsp2不连续缺失30个氨基酸,与高致病性prrsv毒株jxa1和hun4的同源性最高，均为97.8%，判定该分离株为变异的高致病性prrsv。【结论】从吉林省分离到1株高致病性prrsv，说明高致病性prrs变异病毒在吉林省仍然存在。