棉蚜hsp70基因cdna片段的克隆和序列分析

[目的]克隆棉蚜hsp70基因cdna片段,并分析其基因序列.[方法]采集黄色型和绿色型棉蚜,实验室饲养4～5代形成单克隆系,温度处理后提取总rna备用.根据已知昆虫hsp70基因的保守性区域,设计特异性引物,采用rt-pcr方法扩增棉蚜hsp70基因的部分序列,测序后进行核苷酸和推导的氨基酸序列分析.[结果]rt-pcr扩增得到一条长度783bp左右的hsp70基因cdna片段.测序结果显示,所得cdna片段长度为783bp(genbank登录号为:eu109426),且黄色型和绿色型棉蚜的核苷酸序列一致,编码261个氨基酸残基.由棉蚜该片段推导的氨基酸序列与其他昆虫的同源性较高.[结论]获得了棉蚜hsp70基因783bp的cdna片段,该片段编码261个氨基酸残基.