烟草mars的分离及功能鉴定

[目的]研究烟草mars序列对外源基因表达的影响,从中筛选出能明显提高目的基因表达水平的强mars序列.[方法]用pcr方法从烟草基因组中克隆得到3个mars序列(tm1、tm2和tm3),将这3个mars序列分别顺向构建到植物表达载体pbi121gus基因表达盒两端,经农杆菌介导转化烟草,对获得的转基因植株体内的gus酶活性进行了定量检测,分析mars对gus酶活性的影响.[结果](1)序列分析表明,tm2和tm3是两个新的mars序列;(2)gus酶活性的定量检测表明,tm1、tm2、tm3可以使gus基因的平均表达活性分别提高1.4,5.1和1.3倍,但不同转化个体之间的表达水平有明显差异.[结论]虽然克隆到的3个mars序列均可提高外源基因gus的表达,但其并未降低转基因植株个体间外源基因表达水平的差异.