猪瘟流行毒株e2基因主要抗原区的原核高效表达

[目的]构建猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,csfv)e2基因主要抗原区原核表达质粒载体,高效表达e2蛋白,为进一步研究e2亚单位疫苗提供物质基础.[方法]用rt-nestedpcr技术扩增csfv流行毒株sxyl株e2基因主要抗原区,克隆于表达载体pet32a中,成功构建表达质粒pet32a-e2,将pet32a-e2转入bl21(de3)受体菌并用iptg诱导表达e2蛋白,对e2蛋白进行sds-page电泳、western-blot分析和可溶性鉴定.[结果]csfve2基因得到了高效表达,表达蛋白量占菌体蛋白量的33.2%,表达蛋白e2主要以包涵体形式存在;免疫印迹分析结果表明,表达蛋白e2能识别天然猪瘟多克隆抗体.[结论]e2蛋白表达量高并具有生物学活性.