中国野生葡萄白粉菌诱导cdna文库中抗病基因的筛选

[目的]从中国野生华东葡萄白河35-1经白粉菌接种诱导后叶片所构建的cdna文库中,筛选抗病相关基因.[方法]根据植物抗病基因保守序列nbs位点设计特异引物,对葡萄白粉病接种诱导后的环化cdna文库进行菌落pcr筛选,从随机挑选的大量菌落中筛选出82个pcr阳性菌落,提取阳性菌落的质粒进一步进行pcr检测确认,对确认的36个阳性质粒插入片段进行了测序.[结果]测序结果和序列生物信息学分析结果均表明,有3个基因序列与genbank中的已知序列有较高的同源性,其中1个基因序列与葡萄抗白粉病基因(dt661587.1)序列同源性达99%,另外2个基因序列与水分胁迫下葡萄特异表达基因(dt031657.1)和葡萄抗皮尔斯病基因(cf202948.1)的同源性分别为89%和96%.[结论]初步推测获得的3个基因均为抗性相关基因.