sirna干扰atgl基因表达对猪脂肪细胞脂肪分解的抑制作用

【目的】探讨猪脂肪甘油三酯水解酶(adiposetriglyceridelipase,atgl)基因在脂肪细胞脂解中的作用。【方法】构建针对猪atgl基因cds区113和1358位点的慢病毒干扰载体，包装后用其感染猪成熟脂肪细胞，检测atgl和激素敏感脂酶(hormone-sensitivelipase,hsl)基因mrna及其蛋白的表达情况；用甘油试剂盒检测细胞甘油释放量。【结果】成功构建了atgl基因的慢病毒干扰载体，用其感染猪成熟脂肪细胞后，rt-pcr分析和western印迹检测结果表明，试验组脂肪细胞atgl的表达显著下调，hsl的表达没有明显变化；甘油释放量显著降低，其中针对atgl基因cds区113位点的sirna1对atglmrna的干扰效率达55%，甘油释放量降低了49%。【结论】成功构建了猪atgl基因慢病毒干扰载体，其能显著降低atgl基因mrna及其蛋白在猪成熟脂肪细胞中的表达，降低脂肪细胞的甘油释放量，表明atgl在猪脂肪细胞脂解中有着重要作用，且113位点是atgl基因cds区的最佳干扰靶位点。