感染强、弱prrsv毒株的marc-145细胞差异基因文库的构建

【目的】用强、弱prrsvgd株传代毒株感染marc-145细胞，构建marc-145细胞的差异基因cdna文库。【方法】以感染prrsvgd株第100代弱毒株的marc-145cdna为测试组（tester），以感染prrsvgd株第5代强毒株的marc-145cdna为对照组(driver)，采用抑制性消减杂交方法，构建强、弱prrsvgd株感染的marc-145细胞差异基因cdna文库，并使用lamp（loop-mediatedisothermalamplification）技术对试验结果进行验证。【结果】经4次抑制性消减杂交重复试验，得到s8、s29、l6、l26及l30等5个稳定差异表达的基因。lamp结果显示，s8、s29、l6、l26及l30均为差异表达基因，这与抑制性消减杂交结果吻合。【结论】成功构建了感染强、弱prrsv毒株的marc-145细胞差异基因文库，为研究s8、s29、l6、l26和l30基因与prrsv感染体外培养细胞marc-145的关系奠定了基础。