肉牛早孕因子（epf）的活性检测及分离纯化

【目的】检测怀孕肉牛早孕因子(earlypregnancyfactor,epf)的活性，并对其进行分离纯化，以期为epf快速检测方法的建立提供依据。【方法】采集妊娠1～9个月的肉牛血样，并进行妊娠诊断，通过玫瑰花环抑制试验(rosetteinhibitiontest,rit)检测其早孕因子的活性。对有活性的血样依次进行deae-52离子交换层析、conasepharose4b亲和层析和heparinsepharosecl6b亲和层析，分离纯化epf，对纯化产物进行sds-page检测，并测定其等电点。【结果】怀孕牛和未怀孕牛血清的玫瑰花环抑制滴度差异显著(p<0.05)。玫瑰花环抑制试验显示，纯化出的epf具有活性，其分子质量为53.6ku，等电点为6.8。【结论】利用玫瑰花环抑制试验检测早孕因子活性，可以鉴定肉牛的妊娠状态；利用层析的方法可以分离出早孕因子的活性蛋白。