谷氨酸脱羧酶亲和层析介质制备

将sepharose’r4b用环氧氯丙烷活化，接丁二胺臂，再用环氧氯丙烷活化，与谷氨酸的n-2氨基偶联。在n，n-二环己碳化二亚胺催化下,以接臂的胶与谷氨酸的c-5和c-1羧基基团偶联。结果表明，谷氨酸n-2氨基偶联和c-1羧基偶联的亲和介质对小麦谷氨酸脱羧酶有部分亲和作用，洗脱下的酶活低，而谷氨酸c-5羧基基团偶联的层析介质对小麦谷氨酸脱羧酶有完全亲和作用，洗脱的酶活高。谷氨酸能从亲和材料上洗脱掉脱羧酶，但它抑制酶活，而同等浓度的4-氨基丁酸和谷氨酰胺梯度洗脱没有作用。