成体小鼠骨髓中神经干细胞的分离与培养

在无菌条件下抽取成体小鼠骨髓，在含体积分数1%b27,20ng/mlegf和10ng/mlbfgf的f12dmem(1∶1)培养基中，于37℃、50ml/lco2饱和湿度下常规培养，对培养的细胞进行nestin免疫荧光染色检测，并将pegfp-n2基因在80v、80μs条件下采用电击法转化导入神经干细胞中。结果表明,培养7d后，有大部分细胞聚集成团，并大量增殖;nestin免疫荧光染色后呈阳性;导入pegfp-n2基因的神经干细胞培养后在荧光显微镜下可观察到绿色荧光。表明从成体小鼠获得的骨髓，在该试验培养条件下有神经干细胞生成，并且外源标记基因pegfp-n2在其细胞中实现了表达。