拟南芥热激转录因子athsfa6a的克隆与细胞定位分析

[目的]研究拟南芥热激转录因子athsfa6a在植物细胞中的定位及其作用机制.[方法]用rt-pcr方法从野生型拟南芥总rna中,扩增获得了849bp的拟南芥热激转录因子athsfa6acdna片段,经过测序,结果与公布的序列完全相同.将该片段与绿色荧光蛋白(gfp)基因的cdna重组,并克隆到表达载体pchf3上,经pcr与酶切检测表明构建的表达载体正确.按照clough等的方法转化拟南芥,经kanamycin筛选和pcr检测,得到转基因植株;用激光共聚焦扫描荧光显微镜观察转基因植株幼苗的根部.[结果]在正常条件下,融合蛋白存在于细胞质中.[结论]在正常条件下拟南芥热激转录因子athsfa6a在细胞质中表达.