杀天牛毒蛋白的分离纯化及其n-末端氨基酸序列的测定

[目的]从白僵菌代谢物中分离对天牛有毒性的蛋白,并测定其n-末端氨基酸序列.[方法]从球孢白僵菌培养滤液中分离蛋白类代谢物,以重要林业害虫松墨天牛幼虫为试虫筛选毒蛋白,对筛选的毒蛋白进行page电泳后转至pvdf膜上,测定其末端氨基酸序列.[结果]从白僵菌代谢物中共分离出5种毒蛋白,其中毒性最强的是prbb4蛋白,其对松墨天牛幼虫的致死率为56.67%.prbb4蛋白n-末端起始的5个氨基酸序列为谷氨酸(glu)→脯氨酸(pro)→丝氨酸(ser)→异亮氨酸(ile)→缬氨酸(val).[结论]白僵菌代谢物中含杀天牛毒蛋白prbb4,其n-末端氨基酸序列为glu→pro→ser→ile→val.