草鱼肠道胰蛋白酶同工酶gt-a的动力学和热力学性质

[目的]研究草鱼肠道胰蛋白酶的化学组成和酶学性质,以便深入了解该酶的特性并探讨其工业应用潜力.[方法]用生物化学方法结合仪器分析,测定了草鱼消化道胰蛋白酶同工酶gt-a的氨基酸组成,分析了其动力学和热力学性质.[结果]gt-a的最大反应速度(vmax)和米氏常数(km)值分别为2000min-1和21.21μmol,生理转化效率(vmax/km)较高,为94.3min-1·μmol-1;其arrhenius活化能很低,为17.22kj/mol.差示扫描量热分析(dsc)表明,其热变性温度为66.3℃,ca2+的存在可将该酶的热变性温度提高到73.0℃.氨基酸分析表明,草鱼胰蛋白酶gt-a的芳香族氨基酸含量很低,形成二硫键的潜力极低.紫外扫描发现,gt-a在205nm附近有最大紫外吸收,而在280nm附近的吸收很微弱.[结论]gt-a具有冷水性鱼消化蛋白酶的部分特性,且其生理转化效率高而活化能低,具有很好的利用前景.