猪链球菌9型荧光定量pcr检测方法的建立及应用

[目的]建立猪链球菌9型(ss9)的快速诊断和定量分析方法.[方法]根据genbank已登录的ss9cps9h基因保守部分序列设计合成引物和taqman荧光探针,建立了ss9的taqman荧光定量pcr检测方法(taq-manfqpcr),并进行了敏感性、特异性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省11例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测,并与常规pcr方法进行了对比.[结果]成功建立了ss9的fq-pcr检测方法和定量标准曲线,fq-pcr方法的检测灵敏度可达1.0拷贝/μl,特异性高且重复性良好;利用该方法对11份临床疑似猪链球菌感染组织病料进行的应用检测表明,其中有3份样品为阳性,与常规pcr方法检测的阳性符合率为100%.[结论]成功建立的ss9fq-pcr诊断方法,可用于临床ss9型病菌感染的快速诊断及样品中细菌含量的定量分析.