d101树脂固定中性蛋白酶的条件优化及酶学性质研究

【目的】提高中性蛋白酶的固定化效果，对d101树脂固定中性蛋白酶的条件进行优化并对固定化酶的酶学性质进行研究。【方法】以d101树脂吸附法固定中性蛋白酶，分别测定不同温度、时间和加酶量条件下固定化酶的固定化效果，并对固定化中性蛋白酶和游离中性蛋白酶的酶学性质进行比较研究。【结果】d101树脂固定中性蛋白酶的最佳固定条件为：加酶量150u/g，温度40℃，固定时间120min，此时固定化酶的酶活回收率最高（70%）。固定化中性蛋白酶和游离中性蛋白酶的最适温度分别为46和40℃，最适ph值分别为7.4和7.2，表观米氏常数km分别为0.22和0.20mg/ml，最大酶促反应速度vmax分别为0.39和0.21ml/min。【结论】以d101树脂固定中性蛋白酶后，固定化中性蛋白酶的活力、酶活回收率以及热稳定性和ph稳定性显著提高。